质谱(MS)是一种强大的生物标志物分析方法因为它使高度敏感和准确的测量目标分子在临床样本。女士在临床诊断中的应用,如新生儿代谢筛查,进步了关注代谢物标记。女士测量蛋白质目前主要用于小说标记发现研究,但越来越多的兴趣在临床标记诊断中的应用作为替代分析。
MS-based量化的蛋白质生物标记物主要由一个自底向上的方法使用获得的肽片段酶蛋白与胰蛋白酶消化。标准消化协议需要反应时间超过20小时,这是一个样品制备工作流的病原因素。
虽然蛋白质女士量化的高度敏感,血浆和血清蛋白质组是高度复杂的,和干扰其他组件构成了重大挑战。高精度检测目标标记,方法主要用于工厂化养殖血清蛋白组件(如白蛋白或选择性富集目标使用抗体标记列已报告,但脱靶效应定量结果和处理多个样本的困难仍障碍。
合作研究小组的一项新研究特别大学滨松大学医学院和北里大学都集中在可溶解的聚丙烯酰胺凝胶使用N, N´bis(丙烯酰)乌洛托品(BAC)作为交联来解决这些问题。BAC交联聚丙烯酰胺凝胶容易溶解,减少治疗,使蛋白质的复苏已经逃到解决方案。研究人员发现,恢复蛋白质适合快速胰蛋白酶消化在高温条件下,成功地建立高通量样品制备方法MS-based生物指标量化,他们称之为BAC-DROP (BAC-Gel溶解消化PAGE-Resolved目标蛋白质)。
高分辨率的蛋白质分离与BAC-DROP女士特别有效的量化目标跟踪标记蛋白质来自临床样本。通过引入BAC-DROP MS-based量化工作流的炎性生物标志物c反应蛋白(CRP),该研究小组能够成功完成只有5个小时的样品预处理和量化CRP从0.5µL人类血清样本。他们也成功的乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学诊断HBsAg量化结合BAC-DROP和女士。
最近,病毒感染的诊断女士的兴趣一直在快速增加,以COVID-19的诊断。的高通量样品制备方法,BAC-DROP所示本研究将不仅适用于乙肝病毒也给其他病毒性传染病样本。
