超快的屏幕设计师尿液中药物使用高通量质谱

Nikunj r·帕里克说,米歇尔·p·米勒,沃恩和罗姆

安捷伦科技公司。韦克菲尔德,麻萨诸塞州,美国。电子邮件:(电子邮件保护)

介绍

浴盐,非正式的“街”的名字组成一个新的家庭的设计师药物,合成cathinones效果类似于安非他明或可卡因。浴盐可以修改结构,合成容易,防止其被发现在常规法医药物筛选。在本文中,我们提出一个超速的方法筛选小组六个浴盐在尿液样本使用高通量质谱分析系统。浴盐的分析准确和精确测量的线性范围内31 - 1000 ng毫升¹。增加敏感性和特异性实现相比,传统的检查方法在不影响吞吐量和速度。

合成cathinones源于cathinone阿拉伯茶的精神组件工厂(Catha鸡蛋果Forsk)。虽然cathinone衍生品曾被用作活性药物成分在许可的药品(例如,amfepramone),过去的十年见证了不受监管的ring-substituted cathinone衍生品进入毒品市场。¹这些衍生品包括甲卡西酮(ephedrone) mephedrone (4-methylmethcathinone 4-MMC) methylone (bk-MDMA;3,4-methylenedioxy -N4-methylenedioxypyrovalerone -methylcathinone), MDPV (3), methedrone (bk-PMMA;4-methoxymethcathinone)和购买力平价(a-pyrrolidinopropiophenone)。而cathinone本身和甲卡西酮是监管,其他衍生品尚未受到国际控制——尽管欧洲已经颁布了一项禁止mephedrone和美国毒品管制局(DEA)暂时禁止mephedrone, MDPV methylone,他们安排我(分类”bdapp官方下载安卓版现未认可医疗用途和高潜在滥用”)的地位。^1,2,3

Cathinone衍生品强大的精神兴奋剂,安非他命类似的效果,和缺乏监管导致他们被认为“法律高位”,被贴上“浴盐”或“植物食品”和包装标志着“不适合人类消费”为了规避检测,¹我们最近发布了一个报告识别多达37不同品牌报道236例治疗浴盐。⁴浴盐的使用提供了一个重要的公共卫生风险,增加毒性的报道和死亡率,和浴盐的医学报告用户出现心动过速,高血压、高热、癫痫、严重恐慌发作、躁动、妄想、幻觉和暴力行为(包括自残、自杀和杀人的活动)。^5,6

浴盐可以修改结构,合成容易,防止其被发现在常规药物筛选。传统法医药物测试依赖于免疫测定筛选紧随其后的是气相色谱/质谱(GC / MS),最近,液相色谱/质谱(LC / MS)进行定量分析。需要更大的吞吐量,更快的周转时间,和提高特异性,这些传统技术提出了更高的要求。在目前的研究中,一个方法来筛选尿mephedrone six-drug面板组成,methylone,甲卡西酮,fluoromethcathinone, methoxymethcathinone MDPV女士(图1)是使用高通量与串联质谱系统固相萃取(SPE / MS / MS)系统能够分析样品周期在15秒。

实验

的高通量女士是速射的MS / MS系统(安捷伦科技有限公司),由一个超速autosampler和在线SPE乐器,三重四极质谱仪,专有的定性和定量分析软件。样本分析每个样品14年代的速度。也许使用的条件如表S1在网上找到补充信息。注射周期的标准曲线也可以发现在网上补充材料部分,显示如图S1。分析物和内标离子同时监控所有六个浴盐在所有实验药物。

Mephedrone methylone,甲卡西酮、fluoromethcathinone methoxymethcathinone和MDPV(1毫克毫升¹在甲醇)和mephedrone-d3(100µg毫升¹在甲醇),从Cerilliant购买,圆的石头,TX,美国。所有其他的LC / MS级溶剂和试剂购自Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国。

标准校准器被飙升无毒人类准备与1000 ng毫升尿液¹mephedrone、methylone甲卡西酮、fluoromethcathinone methoxymethcathinone MDPV。双重的连续稀释)被用来实现剩余的标准浓度校准器。一组标准的校准器包含所有六个分析物的浓度范围内31 - 1000 ng毫升¹,以及负矩阵控制也飙升100000 ng毫升¹同一个类的干扰药物:methylenedioxyamphetamine (MDA),彼(MDMA) methylenedioxyethylamphetamine (MDEA),安非他命,甲基苯丙胺麻黄碱和伪麻黄碱。

所有样本稀释1:10用水包含isotopically-labelled methylone-d3作为常见的内部标准(100 ng毫升¹最终浓度)。样品被转移到96孔板,离心机,注入到MS / MS系统。准备校准标准运行一天四次,在一系列的四天,建立内部和inter-day精密度和准确度。方法的重现性测试通过测量2000顺序注射6毫升尿液分析物飙升到100 ng¹。相同的墨盒是用于所有2000年注射泵压力没有偏差或峰值形状。

定性分析和定量分析软件被用于数据分析。1 /ײ权重因子应用在校正曲线的线性回归。定量是由光谱峰面积比到一个已知浓度的内部标准。

结果与讨论

Mephedrone methylone,甲卡西酮、fluoromethcathinone methoxymethcathinone和MDPV内部,inter-day精度在15%,变异系数值小于10%浓度在线性范围内。这个方法有线性测量范围内31 - 1000 ng毫升¹与一个R²为每个分析物值> 0.998。只有准确度和精密度的措施(表1)和标准曲线线性methylone这里介绍(图2);其他细节和结果分析物在网上补充材料部分。定量的极限(定量限)被确定为31 ng毫升¹所有六个分析物。

表1。盘中,Inter-day精密度和准确度methylone速射的/ MS / MS分析的尿液。

没有观察到任何抑制100000 ng毫升时六个分析物¹MDA、摇头丸、MDEA,安非他命,甲基苯丙胺,麻黄碱和伪麻黄碱是存在于样品。Mephedrone methylone,甲卡西酮、fluoromethcathinone methoxymethcathinone和MDPV都准确地测量,即使在线性范围的低端,尽管存在高浓度的其他药物。负矩阵控制也是测试和确定这些药物无效的任何干涉。

再现性测试,仪器响应稳定所有六个分析物。例如,methylone变异系数为2.05%,精度在2%(图3)。

结论

六个浴盐的面板是快速、精确地量化尿液中使用一个简单的“稀释和射击”(直接进样)方法。与峰注射周期14年代,这种筛选方法能够吞吐量超过每小时240个样本。使用这个SPE / MS / MS方法,提高敏感性和特异性都取得了比传统的筛选方法在不影响吞吐量和速度。添加更多的分析物的能力这个面板进一步扩大的潜在使用这种分析系统内cathinone衍生品的检测人体尿液样本。

引用

1. 合成cathinones:药物配置文件,bdapp官方下载安卓版欧洲毒品和毒品成瘾监控中心。可以在:http://www.emcdda.europa.eu/publications/drug-profiles/synthetic-cathinones2013年7月,访问。
2. “欧盟Mephedrone禁令”,Drugnet欧bdapp官方下载安卓版洲。73年,(2011)。可以在:http://www.emcdda.europa.eu/publications/drugnet/online/2011/73/article22013年7月,访问。
3. 美国毒品管制局。药物的事实表:浴盐。可以在:http://www.justice.gov/dea/druginfo/drug_data_sheets/Bath_Salts.pdf2013年7月访问。
4. H.A.施佩尔,马丁瑞安R.G.韦斯顿和j·詹森,“临床经验和分析确认“浴盐”和“法律高位”(合成cathinones)在美国”,中国。Toxicol。(费拉)。499 (2011)。
5. 杰橄榄,狗屁奥罗斯科,中华民国Stellpflug "浴盐:象牙的麻烦”,西方j .紧急情况。地中海。13日,58 (2012)。doi:10.5811 / westjem.2011.6.6782
6. 电子艺界罗斯·m·沃森和b不“‘浴盐’中毒”,心血管病。j .地中海。365、967 (2011)。doi:10.1056 / NEJMc1107097

补充材料

表S1。速射的条件。

表S2。盘中,Inter-day精密度和准确度mephedrone速射的/ MS / MS分析的尿液。

表S3。盘中,Inter-day精密度和准确度的速射的/ MS / MS分析甲卡西酮尿。

表S4。盘中,Inter-day精密度和准确度fluoromethcathinone速射的/ MS / MS分析的尿液

表S5。盘中,Inter-day精密度和准确度methoxymethcathinone速射的/ MS / MS分析的尿液。

表S6。盘中,Inter-day精密度和准确度MDPV速射的/ MS / MS分析的尿液。