仍然是你的分光光度计“医药兼容”?审查的新欧洲药典第十版bdapp官方下载安卓版

内森·休姆和约翰·哈蒙德

Starna科学有限公司Hainault商业公园,52/54,福勒Rd,依尔福IG6 3 ut,英国

介绍

bdapp官方下载安卓版欧洲药典(EP)章2.2.25在紫外和可见光谱(或分光光度法)一直在细节和范围广泛的修订和新版本10.0半岛综合体育官方APP下载德甲¹(10.0从2020年1月1日)是强制性的。一个主要的变化是,现在已经扩展到范围包括高效液相色谱法(HPLC)探测器和过程分析技术(PAT)应用紫外/可见分光光度法(UV / vis)。这是一个相当大的差异从最新的美国药典(USP)章< 857 >²从2019年12月1日在紫外-可见光谱、强制性半岛综合体育官方APP下载德甲,特别不包括高效液相色谱检测器的范围。高效液相色谱和帕特都比基本分光光度法更动态和系统特定的技术,有更多的变量来考虑,所以,为了简单起见,本文将介绍新规定只有在只要它们适用于基本的分光光度法。新版本引入了一些新方法仪器资格并建议新的资格测量参考资料。

标准的重大变化,对仪器用户下面讨论的实践意义。

一般测量原则

这个主题在很大程度上是没有从以前的9.2版³(9.2),但已经广泛重写和扩展10.0。尽管本节描述的著名的UV / vis测量方面,有一些新的特定点需要注意:

UV / vis的定义:EP的目的,紫外线区域现在定义为从180纳米到400纳米,可见从400纳米到800纳米。

用户建议:“定义测量条件获得一个令人满意的信噪比和选择扫描范围,扫描速率和狭缝宽度,提供必要的光学分辨率为目的应用程序在不损失所需的信噪比的线性分析方法。当然,“这是好的做法,但它也表明,当使用二极管阵列工具,“没有必要调整光束大小、扫描范围,扫描速度或狭缝宽度由于光学分辨率一般固定和全谱总是记录”。什么是要做如果这些固定参数不产生合适的信噪比或线性不解释。

细胞(试管)

细胞的光学质量的要求已经修改。路径长度公差为±0.005厘米中指定9.2。当然这是修改为±0.5%,这相当于±0.005厘米为1厘米细胞但成为问题时应用于细胞路径长度要短得多。

而±0.5% 10毫米路径长度公差是在大多数电池供应商的实际能力,路径长度减少了±0.5%宽容变得不切实际。这意味着1 mm路径长度的公差细胞±5µm,即使是最著名的供应商只引用一个宽容的±10µm。而±5µm是可能的,会大大增加成本,使这些细胞不经济作为日常工具。此外,按照逻辑得出结论试管的路径长度10µm会有不可测的宽容的±0.05µm。这使得用户在一个困难的境地,因为应用一个简单的百分比在实践中行不通。还有一个要求9.2“充满了相同的溶剂时,细胞为了包含解决方案检查和补偿液体必须具有相同的透光率”。“相同的”这个词是不可以量化的,现在澄清10.0:“细胞吸光度< @240纳米石英电池,0.093 < 0.035 @650纳米玻璃细胞;当旋转180°持有人,绝对区别< 0.005 a。”

控制设备的性能

所需的仪器资格合规中定义10.0的目的进行分析如表1所示,从标准。

表1。最小测试进行的控制设备性能(从表2.2.25复制。1参考1)。

表1意味着仪器为定性分析带宽并不重要,但它应该记住,如果被检查的光谱包含尖锐或复杂的吸收光谱,测量波长和吸光度的峰值可能依赖于分光光度计的分辨率,并可能出现转移仅仅由于仪器的能力,或缺乏,解决相邻光谱特性。因此,应该谨慎行使在这种情况下,它可能是一项决议推荐资格过程。

前一版的标准包含一组简单的测试来评估波长和吸光度准确度的仪器的性能,杂散光和解决。如果一个仪器通过这些测试可以是声称是“药典兼容”。这种方法的潜在弱点,乐器资格进行下一组操作条件可能不是有效的使用不同的条件进行分析。例如,资格进行紫外线使用氘灯作为源可能没有描述将会发生什么如果实际的分析被执行在可见区域使用卤钨源。而新标准需要合格的相同的参数,证明仪器的需求现在必要的性能进行实际的分析。这一直是一个通用的要求GxP协议,但直到现在没有明确陈述。因此,用户必须确定参数值的范围,系统将用于分析和证明合规超过这个范围。带来的一个后果是,简单的方法通常采用一个为每个参数可能是不够资格考试。的确,现在的标准还要求光度线性是合格的;这无疑意味着多个参考材料需要用准确的吸光度值。 The standard also recommends that the assigned parameter values of the references used for qualification should “bracket” the values to be used in the proposed analysis, so that a laboratory conducting several different assays may need to choose a range of different reference materials to demonstrate full compliance. These may be either purchased “certified reference materials” (CRMs) such as solid filters or liquid filters in appropriate sealed cells, or “solutions prepared in the laboratory”. CRMs have several advantages over laboratory-prepared solutions, and this will be discussed later.

波长精度的控制

用户要求:

“控制波长精度目的适当数量的乐队的光谱范围使用一个或多个参考资料”

和

“建议测试至少2波长托架的光谱范围”

选择的参考资料,提出了峰值波长(见表2)。

表2。用于控制波长波长准确度的例子(从表2.2.25复制。2参考1)。

所有的解决方案和坚实的过滤器是商用crm。注意,稀土元素的光谱中使用这些材料包含尖锐的峰,所以测量峰值波长随仪器分辨率。好的波长crm将注册在不同波长带宽值,和用户应该符合仪器使用中指定的带宽分析专著。

氧化钬解决方案已被用作波长参考多年,但对于波长低于240纳米氧化铈的解决方案,与峰值201海里,现在推荐给这个“紫外线”地区。

玻璃比液体过滤器可能会被认为是更健壮的引用在比色皿,但波长强度值可以从融化融化略有不同所以这些过滤器应该单独认证。解决方案单元过滤器可以清洗(小心),作为一个光学抛光石英表面可以返回一个“干净”的光学特性;然而,这是不推荐用于玻璃过滤器根据定义,清洗可能会改变光学表面的特点,从而使认证无效。

原子谱线如汞、氖、氙主要物理标准和最终的波长参考,因此总是认为是适合乐器资格。谨慎是必要的,然而,随着美国药典章< 857 >指出:“原子发射源的弧,或其形象,需要位于同一光路的形象的主要光源分光计;因此,它只可以使用光谱仪,可以在单光束强度模式和实践应该实现只在一个系统设计,以适应这些来源”。内置的氘和氙气灯通常用于分光光度计光源的光路和发射谱线,可以提供一个有用的常规检查仪器是否有能力单光束波长操作。但是请注意,只引用可见光波长,所以他们不适合紫外线资格。

上面的列表是不规范的,所以如果需要资格推荐的材料都不合适,可以使用其他crm是可用的和。例如,对于那些需要更低紫外线波长的资格,“深紫外线”CRM⁴可以从一个领先的参考材料生产商(RMP),与认证的峰值下降到191海里。一些简单的乐器有一个宽光谱带宽可能无法解决上市引用的锋利的乐队,和这种情况下特殊配方的“绿色染料溶液”⁴提供一个RMP是CRM可以用来限定波长带宽(吸光度)12海里。

无论使用引用,EP的允许公差为台式分光光度计±1纳米波长400纳米以下,和±3 nm 400海里以上。

控制吸光度准确度

本节的10.0介绍了几种改变传统和地方是开放的解释。

重铬酸钾溶液在酸性介质的吸光度参考材料选择多年来引用9.2资格在235、257、313、350和430海里。实验室有选择使用商用crm和大多数规范实验室可能已经有一个或多个引用。然而,不引用最新版,现在建议烟酸的解决方案。EDQM网站还指出10.0包括:

”引入烟酸代替重铬酸钾(达到附件十四)⁵为控制吸光度准确度”。

这意味着重铬酸钾对运营商构成危害,但详细审查的规定,⁶表明,风险,即使在实验室准备重铬酸钾溶液,项都很小的浓度和数量用于仪器资格和不存在在使用商业提供crm在永久密封的细胞形式大多数实验室已经持有这个引用。

此外,烟碱酸不能被视为一个“另类”重铬酸钾除了在某些情况下定义的。首先,重铬酸钾可以证明是更普遍的吸光度的引用,因为它可以在五个认证匀整波长在一个更广泛的波长范围(235 - 430 nm)为烟酸两波长相比,213 nm和261 nm。因此,更多的“支架”分析波长范围的推荐标准。其次,或许更重要的是,烟酸谱明显受到频谱带宽的影响。图1显示了带宽对烟酸的测量值的影响解决方案和重铬酸钾溶液在不同带宽的设置。

图1所示。光谱带宽对测量吸光度值的影响烟碱酸和重铬酸钾的解决方案。烟酸(NA) @ 213 nm和261 nm)和酸性重铬酸钾(PDC)解决方案@ 235海里,257 nm、313 nm和350 nm。

可以看出,烟酸的吸光度值峰值在261 nm,推荐这里的仪器条件,严重影响了bandwidth-indeed效果远远大于公差允许遵从性。重铬酸钾的值相同波长的影响更少。

是很重要的,因此,资格测量使用烟酸是由在同一带宽设置的用于建立参考材料的值。10.0给出了制备过程的参考解决方案“设备资格CRS的烟碱酸”。这种材料可以作为从EDQM固体。有准备的解决方案为指导,然后用户计算参考“特定的吸光度”吸光度值给出了相应的证书。不幸的是,允许使用固体重量的变化将导致最终的解决方案的一个不精确的浓度,因此一个不正确的吸光度计算。此外,证书没有提供的带宽用于确定特定的吸光度,所以认证的价值是相当无意义的。乐器可能无法实现合规仅仅因为资格测量都不知不觉地使用频谱带宽不同,用于确定证书的价值。没有指导给出解的稳定或有效期后准备。使用这种材料,如中描述10.0,因此,不太可能是有效的吸光度的参考。幸运的是,商业烟酸有证,通常可以在任何带宽要求的客户认证。正确使用,烟酸是一种有用的在远紫外吸光度的参考,但不能代替重铬酸钾在更高的波长。

合规,允许差异的实际吸光度测量吸光度和参考材料或±0.010±1%,哪个是更大的,“价值大约在预期的吸光度的两个极限范围应该验证”。这个公差适用于吸光度值2,和建议更高的吸光度是处理“风险评估”的基础上,而没有提供进一步的细节。在这种背景下,烟碱酸和重铬酸钾有可用和可追踪的认证值2.5和3.5,分别,所以直接与信心在这些资格可进行较高水平(图2和3)。

图2。烟酸线性。

图3。重铬酸钾线性。

测光精度的控制和/或线性的可见区域可以使用固体玻璃过滤器实现crm,但与之前的版本(9.2)没有给出具体指导对标准可见区域除了说“合适的固体或液体过滤器”可以被使用。上述言论对波长这里也适用,所以crm以外的其他建议可以使用如果他们更好的匹配使用的操作条件进行分析。

光度线性控制

这是一个新的需求10.0。引用用于资格吸光度准确度可以用来提供他们兼容符合线性分析波长和吸光度范围。烟酸是引用一个例子的范围有些mg L¹。引用的数量来衡量在所需的吸光度范围不是说,但是确定系数(R²0.999)作为合规。满足这个需求是如何离开实验室来决定。幸运的是,有一个明确的,国际认可的ISO标准,ISO 11095,⁷“线性校准使用参考资料”,即引用的数量用于评估一个校准函数应该至少有三个。同样,最新的USP章< 857 >规定,至少有三个引用托架所需的吸光度范围应满足所需的吸光度准确度的标准。三个可能满足吸光度范围有限,说1,但用户可能决定使用更多的在使用更高的吸光度。当使用crm,用户应该记住比较测量值与浓度在评估与认证的价值观,而不是线性的。

控制杂散光

标准的表示:“杂散光在适当的波长决定使用合适的固体或液体过滤器或解决方案准备内部”。前一版(9.2)叫一个杂散光引用,即12 g L¹氯化钾溶液,截止滤光片显示杂散光198海里。现在,四种不同的水解决方案确定,可以允许杂散光检测到在一个波长范围从198纳米到370纳米(表3)。

表3

测试是使用水空白单元进行,并注意到,“用于测试的仪器参数,如狭缝宽度和类型的光源(如氘或钨灯),必须是相同的用于实际测量”。有所有这些参考资料是可用的。

控制的决议(光谱带宽)

这个测试仍在前一版一样。规定的专著中,仪器的分辨率可以通过记录的光谱己烷v / v甲苯0.02%(或庚烷),产生一个光谱吸光度最高在269 nm和最低在267 nm)。最大的比例在269 nm的最低267海里应该如上所述的专著。对于一般指导,然而,图4显示了典型的光谱获得在不同bandwidths-a有用的指南仪带宽是表4所示。

图4。光谱0.02% v / v甲苯在不同光谱带宽己烷。

表4

比己烷庚烷,毒性较低,提出了作为替代溶剂。这不是一个问题,但是,如果测试材料作为密封电池CRM购买。

导数光谱的分辨率测试建议不再包含在标准。半岛综合体育官方APP下载德甲

系统适用性

这个新的部分州:

”系统适用性测试样本测量之前可能需要验证关键参数可能对结果产生影响。这些测试可以覆盖波长准确性,吸光度准确度,杂散光和光度线性。系统功能测试,例如那些执行作为设备自动测试的一部分,可能是系统适用性测试”的一部分。

几种分光光度计模型包含一定程度的自动自检功能。一个典型的例子是使用源灯(氘或氙)发射谱线波长提供一个检查。如上所示,然而,这些检查只在可见区域,用户将不得不决定是否这些测试可以验证关键参数”所需的程度。如果不是,这意味着以前描述的资格测试也可能部分或全部需要执行以及分析。

参考资料:CRM或内部做好准备了吗?

直到1970年代大多数实验室使用内部准备的解决方案或专有的测试材料检查仪器的性能或依赖于制造商校准仪器的日常维护。现在,国际监管的本质要求校准必须有国际有效性,这意味着使用公认的标准校准的目的。有证,由认可的供应商根据国际惯例,有效性。还是完全有可能仪器用户准备自己的参考解决方案,在本标准和指令,但相比使用crm这可以与许多陷阱是一个复杂的过程。明显的参考价值的准确性取决于使用的材料的纯度和准确性的准备过程,如称重和稀释。因此,正常为准备建立一个“不确定性预算”的标准,因此整体参考价值的不确定性,但这也可以复杂。⁸这或许并不令人意外,大多数实验室决定使用商业有证,这一切已经和不确定性是规定证书。

CRM是什么?

所定义的ISO / REMCO(国际标准组织委员会参考资料),一个CRM是一个“参考材料,特点是一个计量有效程序指定一个或多个属性,伴随着参考材料证书,提供指定属性的值,其相关不确定性和计量表可追溯性。”⁹

最初,分光光度计校准与国际公认的唯一可用的引用属性值是那些从国家计量研究院(敝中断)如国家标准与技术研究院(NIST)在美国,谁的产品商标作为标准参考资料(srm)。在任何情况下,良好的实验室实践的出现和类似的质量计划导致了srm的需求的增加,超过了生产能力敝中断的生产能力。商业化生产的参考资料是可用的,但不一定接受监管当局,因此一些生产商与监管机构合作开发参考资料将被视为等同于srm用于校准。这种材料将被称为有证,并得到国家和国际监管机构或认证机构的承认。这些crm可以生产解决方案,提供永久密封成UV质量细胞直接资格测量。这不仅免费用户的任务准备参考解决方案,但实际上消除了任何可能出现的危害直接处理的参考材料。

此外,与内部参考资料,CRM的认证价值不依赖于准确的参考资料已经准备好了,但是在执行校准参考工具,本身已经对初级物理标准或srm校准。当然证书值校准仪的任何变化,但这可以建立的生产者和伴随CRM规定证书。中给出的“扩展不确定度预算”通常校准证书的不确定性预期的测量参数和传统表示置信水平为95%。

有了这些信息,仪器条件变得非常简单。CRM是用来限定乐器时,总允许公差之和证书不确定性和仪器制造商指定精度的仪器,表5。

表5

如果测量值之间的差别和认证值小于总宽容,该仪器可以判定为正常运行。的区别,当然,也小于允许误差由药典或分析专著。

如今,大多数仪器使用有资格执行在制药行业。事实上,美国药典州在其章< 857 >,“尽可能…有用于优先laboratory-prepared解决方案”。套有证可根据新规定,这种方法的一个额外的便利。

可追溯性是非常重要的,因为它借给CRM国际公认的权威引用其校准最终可以追踪。它是定义在99:2007 ISO / IEC指南¹⁰“房地产相关的测量结果,结果可以通过记录引用不间断的校准,链,每个导致测量不确定性”。参考分光光度计使用CRM供应商必须建立认证值,因此,有资格对合适的srm或等主要物理引用元素发射谱线。所使用的引用应该确定伴随CRM的证书。

参考材料的稳定性也很重要,和校准的有效性应规定CRM证书。这通常是两年,但可能不根据实验室的质量协议。换发新证应该执行定期维护认证的有效性。

为用户在购买有证有信心,他们的供应商应该正确认证ISO 17034:2016参考材料生产商的能力“一般要求”。¹¹这是最低要求,包括质量管理体系和技术和制造业务。这个标准包括规范性引用到另一个标准:ISO / IEC 17025:2017《检测和校准实验室能力的通用要求”。¹²ISO 17025规定程序报告和评估测量不确定性和任何主管生产者也应该认可这个标准。ISO 17025认证包括一个声明的“范围”,列出参考资料主管校准实验室。有意购买者应该检查,他们提出了供应商的认证范围包括材料问题:ISO 17025认证的力量就可以声称只有一个材料或校准过程,这可能不包括购买的物品。

结论

喜欢新USP章< 857 >,版10.0EP 2.2.25已大大扩展到更加重视“适用性”的UV / vis仪器。仪器现在必须证明有操作参数下的充分必要的性能函数用于分析。为此,合适的参考资料给出的例子,但建议的材料不能涵盖所有的情况。也有不确定性的解释标准,尤其是在处理吸光度准确度和线性的部分。烟酸作为吸光度建议参考,但数据的准备是有缺陷的,因为它是不精确的,不承认频谱带宽的影响。的一个新规范(细胞路径长度)是无法实现在实践中在许多情况下。然而,幸运的是,标准允许使用非常广泛的crm现在商用仪器资格。明智地选择这些材料有时会提供更好的一致性分析方法的使用比标准的参考文献引用,从而更好的展示“适用性”,提供一个更直接的和方便的途径实现遵从性。

引用

1. bdapp官方下载安卓版欧洲理事会药品和医疗保健的质量(EDQM),“2.2.25吸收分光光度法、紫外和可见”,bdapp官方下载安卓版欧元欧洲药典(博士)。10.0版,42 (2020)。https://www.edqm.eu/en/bdapp官方下载安卓版european_pharmacopoeia_10th_edition
2. 美国药典,< 857 >紫外-可见光谱、USP 42-NF37第二补充(2 s) (2019)。半岛综合体育官方APP下载德甲https://www.uspnf.com/
3. bdapp官方下载安卓版欧洲理事会药品和医疗保健的质量(EDQM),“2.2.25吸收分光光度法、紫外和可见”,bdapp官方下载安卓版欧元欧洲药典(博士)。版本9.2 (2008)。
4. Starna科学有限公司Hainault商业公园,52/54,福勒Rd,依尔福IG6 3 ut,英国。https://www.starna.com/reference-materials/uv-visible-半岛综合体育官方APP下载德甲spectroscopy
5. 监管(EC) 1907/2006号的欧洲议会和理事会,2006年12月18bdapp官方下载安卓版日注册,评估,授权和限制的化学物质(达到)(2006)。
6. 重铬酸钾的使用在欧洲药典;bdapp官方下载安卓版Starna意见书。技术交流,2018年6月
7. 国际标准化组织,“线性校准使用参考资料”,ISO 11095 (1996)。https://www.iso.org/standard/1060.html
8. c·伯吉斯,“没有数学的测量不确定性”,系统地。抛光工艺。2月(2016)。
9. 国际标准化组织,“参考材料术语和定义”,ISO 30:2015指南。https://www.iso.org/standard/46209.html
10. 国际标准化组织,”国际metrology-basic和一般词汇的概念和相关术语(VIM)”, 99:2007 ISO / IEC指南。https://www.iso.org/standard/45324.html
11. 国际标准化组织,“一般要求参考材料生产商的能力”,ISO 17034 (2016)。https://www.iso.org/standard/29357.html
12. 国际标准化组织”,检测和校准实验室能力的通用要求》,ISO / IEC 17025 (2017)。https://www.iso.org/standard/66912.html